簡述垂直轉(zhuǎn)印電泳槽的正確使用方法
更新時(shí)間:2023-06-15 點(diǎn)擊次數(shù):2148
垂直轉(zhuǎn)印電泳槽是一種常見的電泳設(shè)備,用于將蛋白質(zhì)、DNA、RNA等生物大分子的分離和鑒定。其工作原理是利用電場的作用,使帶電的生物大分子在凝膠介質(zhì)中向相反電荷的方向移動,從而達(dá)到分離的目的。
1、制膠:選擇所需間隔厚度的墊條玻璃板,玻璃板上標(biāo)記的箭頭方向向上,玻璃板上有墊條的那面面對操作者。薄玻璃板平行蓋在墊條上。將上述一套玻璃板垂直放入制膠支架,在平整的桌面上將墊條玻璃和薄玻璃的底面在制膠支架上的鎖緊門向二側(cè)旋轉(zhuǎn)鎖緊,完成一個(gè)制膠單元。將準(zhǔn)備好的制膠單元的底面壓到制膠固定架的密封相交條上,制膠支架的后邊盡量靠近制膠固定架,左手輕輕下壓墊條玻璃板上緣至制膠固定架的彈簧夾能卡住為止,右手調(diào)整彈簧夾,使彈簧夾能固定在墊條玻璃的中間位置。按要求調(diào)配合適濃度的膠灌入二塊玻璃板中間的間隙中至薄玻璃板上緣1mm處,插入對應(yīng)厚度和齒數(shù)的梳子,等待膠的凝固。
2、電泳槽準(zhǔn)備:將已制完的二組玻璃板分別裝入電極架的兩面,玻璃板的底部架在電極架的支腳上,薄玻璃的邊緣與電極架的紅色橡膠條緊貼。如僅走一塊膠,可用提供的玻璃替代塑料片裝在電極架的另一面。將裝完玻璃板的電極架插入垂直槽槽內(nèi)固定架,并確認(rèn)電極架已到底。再下壓已裝入的電極架的電極二邊外突部分,使玻璃底面與電極架支腳面分離。將垂直槽槽內(nèi)固定架上的鎖緊門向中間旋轉(zhuǎn)鎖緊。
3、電泳:在內(nèi)槽中加入電泳緩沖液,直至電泳液溢出到外槽中,外槽中電泳液高度約3—5cm。在梳井內(nèi)加樣,注意避免引入氣泡。蓋好上蓋。保證電極架的正負(fù)極與槽蓋的正負(fù)極始終相對應(yīng)。接通電泳儀,電壓推薦使用60V—200V。
總之,垂直轉(zhuǎn)印電泳槽是一種重要的生物分子分離和鑒定設(shè)備,使用時(shí)需要注意安全和準(zhǔn)確性等方面。只有正確地使用和維護(hù)設(shè)備,才能保證分離效果和延長設(shè)備的使用壽命。